Paskirtis

Dengės karštligės NS1 Ag-IgG/IgM kombinuotas testas yra greitas chromatografinis imunologinis tyrimas, skirtas kokybiškai aptikti antikūnus (IgG ir IgM) ir dengės karštligės viruso NS1 antigeną prieš dengės karštligės virusą serume arba plazmoje, siekiant padėti diagnozuoti dengės karštligės virusinę infekciją.

[SANTRAUKA]

Dengės karštligė yra ūmi pernešėjų platinama infekcinė liga, kurią sukelia dengės karštligės virusas, perduodamas uodų.Dengės karštligės virusinė infekcija gali sukelti recesyvinę infekciją, dengės karštligę, hemoraginę dengės karštligę, hemoraginę dengės karštligę.Tipiški klinikiniai dengės karštligės pasireiškimai yra staigi pradžia, aukšta temperatūra, galvos skausmas, stiprus raumenų, kaulų ir sąnarių skausmas, odos bėrimas, polinkis kraujuoti, limfmazgių padidėjimas, sumažėjęs baltųjų kraujo kūnelių skaičius, trombocitopenija ir pan.Ši liga iš esmės yra populiari atogrąžų ir subtropikų srityse, nes šią ligą perneša Aides uodai, populiarumo priežastis yra tam tikras sezoniškumas, kiekvienais metais dažniausiai būna gegužės - lapkričio mėnesiais, pikas yra liepos - rugsėjo mėnesiais.Naujojoje epidemijos zonoje gyventojai paprastai yra jautrūs, tačiau dažniausiai serga suaugusieji, endeminėje zonoje dažniausiai serga vaikai.

Principas

Dengės karštligės NS1 Ag-IgG/IgM kombinuotas testas yra kokybinis membranos juostelės imunologinis tyrimas, skirtas aptikti dengės karštligės viruso antikūnus (IgG ir IgM) ir dengės karštligės viruso NS1 antigeną serume arba plazmoje.

IgG/IgM testui: Bandymo prietaisą sudaro: 1) bordo spalvos konjugato padėklas, kuriame yra dengės karštligės rekombinantinių apvalkalo antigenų, konjuguotų su koloidiniu auksu (dengės karštligės konjugatai), 2) nitroceliuliozės membranos juostelė, kurioje yra dvi tyrimo linijos (T1 ir T2 linijos) ir valdymo linija (C linija).T1 linija yra iš anksto padengta antikūnu IgM anti-dengės karštligei aptikti, T2 linija padengta antikūnu, skirta IgG antidengės karštligei aptikti.Kai į tiriamosios kasetės mėginio šulinėlį išleidžiamas pakankamas tiriamojo mėginio tūris, mėginys kapiliariniu būdu migruoja per kasetę.IgG anti-dengė, jei yra mėginyje, prisijungs prie dengės karštligės konjugatų.Tada imunokompleksą užfiksuoja reagentas, iš anksto padengtas T2 juosta, sudarydamas bordo spalvos T2 liniją, rodančią teigiamą dengės karštligės IgG testo rezultatą ir rodo neseniai užsikrėtusią arba pasikartojančią infekciją.IgM anti-dengė, jei jo yra mėginyje, prisijungs prie dengės karštligės konjugatų.Tada imunokompleksą užfiksuoja reagentas, padengtas T1 linija, suformuojant bordo spalvos T1 liniją, rodančią teigiamą dengės karštligės IgM testo rezultatą ir nurodant naują infekciją.Bet kokių T linijų (T1 ir T2) nebuvimas rodo neigiamą rezultatą.

Atliekant NS1 testą: atliekant šią tyrimo procedūrą antikūnas prieš dengės karštligę NS1 yra imobilizuojamas kasetės tyrimo linijos srityje.Kai viso kraujo / serumo / plazmos mėginys įdedamas į mėginio duobutę, jis reaguoja su anti-Dengue NS1 antikūnais padengtomis dalelėmis, kurios buvo uždėtos ant mėginio padėklo.Šis mišinys chromatografiškai migruoja per bandymo juostelės ilgį ir sąveikauja su imobilizuotu anti-Dengue NS1 antikūnu.Jei mėginyje yra dengės karštligės viruso NS1 antigeno, tyrimo linijos srityje atsiras spalvota linija, nurodanti teigiamą rezultatą.Jei mėginyje nėra dengės karštligės viruso NS1 antigeno, šioje srityje nebus rodoma spalvota linija, rodanti neigiamą rezultatą.

Kad būtų naudojamas kaip procedūrinė kontrolė, kontrolinės linijos srityje visada atsiras spalvota linija, nurodanti, kad buvo pridėtas tinkamas mėginio tūris ir įvyko membranos sugėrimas.

Sandėliavimas ir stabilumas

Laikyti supakuotą sandariame maišelyje kambario temperatūroje arba šaldytuve (4-30 ℃ arba 40-86 ℉).Bandymo prietaisas yra stabilus per galiojimo datą, atspausdintą ant sandaraus maišelio.

Bandymas turi būti laikomas sandariame maišelyje iki naudojimo.

Mėginių paėmimas ir paruošimas

1. Dengės karštligės NS1 Ag-IgG/IgM kombinuotą testą galima atlikti naudojant serumą arba plazmą.

2. Paimti viso kraujo, serumo ar plazmos mėginius taikant įprastas klinikines laboratorines procedūras.

3. Bandymas turi būti atliktas iš karto po mėginio paėmimo.Nepalikite mėginių kambario temperatūroje ilgą laiką.Ilgalaikiam saugojimui mėginiai turi būti laikomi žemesnėje nei 20 ℃ temperatūroje.

4. Prieš pradėdami tyrimą, pašildykite mėginius iki kambario temperatūros.Užšaldyti mėginiai turi būti visiškai atšildyti ir gerai išmaišyti prieš atliekant tyrimą.Mėginių negalima pakartotinai užšaldyti ir atšildyti.

Bandymo procedūra

Leiskite bandymui, bandiniui, buferiui ir (arba) kontrolei pasiekti kambario temperatūrą 15–30 ℃ (59–86 ℉) prieš pradedant tyrimą.

1. Prieš atidarydami maišelį pašildykite iki kambario temperatūros.Išimkite bandymo prietaisą iš sandaraus maišelio ir naudokite kuo greičiau.Padėkite bandymo prietaisą ant švaraus ir lygaus paviršiaus.

2. Atliekant IgG/IgM testą: laikykite lašintuvą vertikaliai ir įpilkite 1 lašą mėginio (apie 10 μl) į bandymo prietaiso mėginio šulinį (S), tada įlašinkite 2 lašus buferio (apie 70 μl) ir įjunkite laikmatį.Žiūrėkite iliustraciją žemiau.

3. Atliekant NS1 testą: laikykite lašintuvą vertikaliai ir įpilkite 8–10 lašų serumo arba plazmos (apie 100 μl) į bandomojo prietaiso mėginio šulinėlį (S), tada įjunkite laikmatį.Žiūrėkite iliustraciją žemiau.

4. Palaukite, kol pasirodys spalvota (-os) linija (-ės).Rezultatus skaitykite po 15 minučių.Neaiškinkite rezultato po 20 minučių.

Rezultatų interpretavimas

Teigiamas:

IgG/IgM testui: ant membranos atsiranda kontrolinė linija ir bent viena tyrimo linija.T2 tyrimo linijos atsiradimas rodo, kad yra dengės karštligei specifinių IgG antikūnų.T1 tyrimo linijos atsiradimas rodo, kad yra dengės karštligei specifinių IgM antikūnų.Ir jei atsiranda ir T1, ir T2 linijos, tai rodo, kad yra ir dengės karštligei specifinių IgG, ir IgM antikūnų.Kuo mažesnė antikūnų koncentracija, tuo silpnesnė rezultato linija.

NS1 testui: pasirodo dvi eilutės.Viena eilutė visada turi būti kontrolinės linijos srityje (C), o kita matoma spalvota linija – bandymo linijos srityje.

Neigiamas:

Kontrolinėje srityje (C) atsiranda viena spalvota linija. Bandymo linijos srityje nėra matomos spalvotos linijos.

Netinkama: nepasirodo valdymo eilutė.Nepakankamas mėginio tūris arba neteisingi procedūrų metodai yra labiausiai tikėtinos kontrolės linijos gedimo priežastys.Peržiūrėkite procedūrą ir pakartokite testą su nauju bandymo prietaisu.Jei problema išlieka, nedelsdami nustokite naudoti bandymo rinkinį ir susisiekite su vietiniu platintoju.